Di laboratorium medis, risiko kontaminasi kultur sel tidak terhitung – tidak peduli seberapa teliti pekerjaannya. Sudah pasti tidak jarang ada risiko yang salah perhitungan, dan kontaminasi sering mengakibatkan hilangnya kultur. Oleh karena itu, di blog ini, kami ingin menjelaskan cara mendeteksi dan menghindari kontaminasi secara sistematis di jalur sel.
Setiap laboratorium medis berada di bawah ancaman hari demi hari
Kontaminasi mikroba dalam kultur sel—termasuk yang dibeli dari pihak ketiga—tidak jarang terjadi di laboratorium. Faktanya, yang terjadi justru sebaliknya: Banyak garis sel yang tumbuh di laboratorium terinfeksi mikoplasma. Spora jamur kecil ada di mana-mana dan dapat menyebar melalui udara. Tentu saja, saat bekerja di lingkungan yang steril, ada ruang untuk human error. Sangat mudah untuk membuat kesalahan.
Skenario horor di laboratorium kultur sel - semua jenis kontaminasi:
Kontaminasi mikroba (bakteri, mikoplasma, jamur, ragi, dll.)
Kontaminasi virus Kontaminasi
protein (prion)
Kontaminasi kimia (yang dapat dilepas dan diekstrak dari plastik, logam berat, dll.)
Silang- kontaminasi dengan kultur sel lain
Dari mana datangnya polusi?
1. Seberapa "bersih" budaya aslinya?
Masalah sering dimulai dengan bahan sumber. Bahkan dengan segala upaya yang mungkin dalam produksi media, beberapa bahan tidak dapat dibuat steril sepenuhnya. Oleh karena itu, selalu ada risiko mikoplasma keluar dari filter steril. Prion bahkan dapat bertahan hidup dalam sterilisasi uap pada suhu 121 °C.
2. Apakah laboratorium kerja benar-benar lingkungan yang steril?
Salah satu penyebab utama kontaminasi laboratorium adalah tubuh manusia. Misalnya, banyak contoh kontaminasi silang dapat dihindari jika teknisi lab menghindari menangani beberapa lini produksi pada waktu yang sama di bangku steril. Satu biakan dapat dengan cepat menulari biakan lain jika cairannya tidak ditangani dengan benar.
Juga, terburu-buru adalah musuh terburuk dari pekerjaan yang membosankan. Pintu inkubator laboratorium tidak boleh dibuka tanpa sebab, dan tentunya tidak boleh dibiarkan terbuka dalam waktu yang lama. Tidak peduli berapa banyak tekanan waktu yang mungkin mereka alami, teknisi lab hanya boleh bekerja pada satu jalur sel dalam satu waktu. Saat membongkar pipet sekali pakai di bawah bangku, tutupnya harus disisihkan setelah dibuka.
3. Apakah Anda menggunakan peralatan laboratorium yang benar?
Tentu saja, bahkan peralatan yang digunakan di laboratorium medis sangat mungkin menyebabkan kontaminasi pada kultur sel. Oleh karena itu, kami merekomendasikan:
Gunakan wadah plastik bebas peliat
Pilih lokasi yang cocok untuk inkubator (lokasi di dekat wastafel dapat menyebabkan kontaminasi sabun)
Gunakan aksesori inkubator yang terbuat dari tembaga yang disterilkan
Ketika antibiotik digunakan, jalur bebas antibiotik harus dibiakkan dari waktu ke waktu. (Ini karena antibiotik dapat menutupi kontaminasi dan infeksi dapat menyebar.)
Metode investigasi apa yang dapat digunakan untuk melacak infeksi yang mana?
Salah satu hal paling berbahaya tentang infeksi mikoplasma adalah sering tidak terdeteksi dalam waktu lama. Pada prinsipnya, kejadian polusi dapat dikontrol dan dilacak dengan berbagai metode, beberapa sangat canggih dan lainnya kurang begitu.
Teknisi laboratorium yang berpengalaman dapat mengetahui apakah telah terjadi kontaminasi silang hanya dengan melihat di bawah mikroskop.
Jika kita mengekstrak semua DNA dari kultur sel, metode PCR dapat digunakan untuk mendeteksi kandungan DNA mikoplasmanya.
Laboratorium yang melakukan transduksi virus atau bioassay juga harus memeriksa kontaminasi virus.
Laboratorium yang memproduksi obat untuk terapi baru harus memeriksa risiko rendah bakteri, spora, jamur, mikoplasma, HIV, HCV, dan BSE.
Bagaimana polusi harus ditangani?
Setiap contoh kontaminasi harus didokumentasikan dan dinilai. Jika tidak ada yang lain, laboratorium medis yang menyembunyikan masalah polusi membahayakan reputasi baik mereka.
Tentu saja, tindakan pembersihan khusus juga harus dilakukan jika terjadi kontaminasi: dalam kasus infeksi jamur, disarankan untuk memeriksa apakah laboratorium telah didesinfeksi secara teratur dengan bahan berbasis alkohol
Sebagai aturan umum, disinfeksi semprot atau lap secara teratur interior
inkubator ilmiah dengan larutan berbasis alkohol membantu menghindari kontaminasi
Sterilisasi udara panas bulanan adalah praktik medis standar di banyak laboratorium
Untuk sel punca yang sensitif, hanya dalam kasus yang jarang terjadi garis sel yang terinfeksi dapat diobati dengan antibiotik. Dalam kebanyakan kasus solusinya mahal - budaya harus dibuang dan pekerjaan harus dimulai dari awal
sebagai kesimpulan:
Mampu secara konsisten mendeteksi, memvalidasi, dan menangani kontaminasi sangatlah penting, terutama di laboratorium medis yang bekerja dengan sel punca yang sangat sensitif dan tidak menggunakan antibiotik. Pemantauan yang transparan sangat penting. Menutupi kontaminasi atau membiarkannya menyebar hanya akan meningkatkan bahaya dan tidak perlu. Inkubator Suhu
Konstan harus selalu menjadi komponen teraman dari seluruh langkah proses; jika sampel terkontaminasi, maka dalam banyak kasus hal ini terjadi di hulu atau hilir budidaya
inkubator pendingin .